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新的突破提供快速而精确地检测低水平的肠溶病毒

前5名水污染物

水性微生物污染物曾经被认为受到控制,正在吸引重新关注。对饮用水中先前未被发现的微生物污染物的存在的认识正在增加。金宝搏188dyc通过开发一种改进的水病方法,亚利桑那州微生物学家大学是助致的凯莉A.亚利桑那大学土壤,水和环境科学大学的扩大意识A. Reynolds开发了一种能够快速且精确地检测低的方法大量水浓缩物中肠溶病毒的水平,从而克服了以前的测试策略的局限性。

她的方法被认为是检测饮用水中病毒的重大突破。金宝搏188dyc不容易检测到病毒。通常在水中呈现出非常低的数量,病毒仍然可以造成健康风险,因为水系统中只需要一个病毒来感染水上疾病的人。(细菌是不同的。有些只需要10个,但通常感染剂量更接近1,000。)对病毒测试的挑战是能够在非常大的水量中检测非常低的病毒。

由于人类病毒通常在环境中非常低,因此需要在分析之前浓缩水样。然后依赖于动物细胞培养物的病毒检测方法。将水样浓缩物加入含有支持病毒生长的猴或人细胞的培养烧瓶中。然后将细胞观察到几天至周的时间,以检测表明病毒生长的细胞破坏的迹象。细胞培养的优点是它仅检测感染的病毒菌株,并且可以在浓缩后测试大样品体积。然而,细胞培养可能需要很长一段时间。一些肠道病毒的菌株可能需要两周的初步结果增长,确认结果可能需要长达三周或更长时间。虽然在细胞中生长,但在细胞中生长,但虽然在细胞中生长,但也没有显示细胞破坏的任何视觉迹象,因此未被发现。

这种叫做非胞素疗法病毒的这种病毒的实例是某些旋转病毒和甲型肝炎的菌株。细胞培养的局限性促使科学家转向分子检测方法以常规监测病毒。不同生物的不同核酸序列可以在遗传水平下分化,分子方法可以检测病原体的遗传物质(RNA或DNA)的存在。最常用的分子方法,聚合酶链式反应(PCR)可以快速检测肠道病毒,只需24小时即可用于明确的结果。在许多方面,PCR比常规细胞培养更有效,并且已被证明是用于检测病毒的快速,敏感,具体和廉价的方法。

然而,分子方法也具有缺点。它们的检测灵敏度通常通过环境浓缩物中的抑制化合物降低。假冒否定会导致。此外,PCR不区分非染色和传染性病毒颗粒,从而使PCR阳性结果复杂化并对公共卫生的含义。它在这种情况下,即,响应于细胞培养物和分子方法的局限性,雷诺斯开发了综合细胞培养/ PCR方法,以常规监测传染性肠溶病毒。ICC / PCR保留了常规细胞培养和分子方法的许多优点,但没有它们的局限性。

危险的水污染物

将样品浓缩物加入细胞培养烧瓶后,Reynolds在细胞培养基上施加PCR。通过将PCR施加到培养基中,不需要冗长的孵育时间,因为PCR能够检测细胞培养物中的低水平病毒生长。如果未使用PCR,结果将被延迟,直到细胞破坏的视觉迹象变得明显。此外,通过将分子法与细胞培养物集成,PCR结果更可靠。由于只有在细胞培养中发生的传染性病毒发生,因此不存在关于PCR检测到的病毒是否感染的混淆。DECC / PCR检测到的所有病毒随后是传染性的,结果是在24-48小时内获得,而单独的细胞培养所需的天或数周或数周。

此外,ICC / PCR克服了PCR抑制性化合物的效果,否则可能导致错误的阴性结果,并且能够检测非胞素致病病毒,例如,在细胞中生长的某些旋转病毒和甲型肝炎的菌株而没有细胞破坏的视觉迹象。随着改善,可行的病毒检测灵敏度和降低的测定时间,ICC / PCR是有效环境病毒监测的未来。即使具有适用于直接PCR扩增监测的样品,具有低抑制化合物和足够高的靶生物,随后使用ICC / PCR将有助于评估目标的可行性,并且具有最小的成本和时间受累。

ICC / PCR方法的影响将获得重要性,因为水质测试越来越多地包括对病毒的更频繁监测。此方法还将用于评估各种水处理和消毒方法的有效性,涉及除去或灭活人肠道病毒。

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